استفاده از روش nested-pcr برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس pestivirus

نویسندگان

سید علی قرشی

مرتضی دلیری جوپاری

دینا مرشدی

ترانه حاجیان

محسن لطفی

چکیده

در این مطالعه یک روش nested-pcr برای تشخیص دو ویروس bvdv از سویه nadl بهینه سازی گردید. در آزمایش rt-pcr، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه '5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول pcr در وکتور r/t57ptz کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش nested-pcr انجام گردید و یک قطعه dna به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش rt-pcr، 50tcid 104 و میزان حساسیت آزمایش nested-pcr در تشخیص ویروس bvdv در کشت سلول، 50tcid102 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت های سلولی با سه روش pcr, elisaو nested-pcr مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه ها نسبت به روش elisa بیشتر می باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

استفاده از روش Nested-PCR ‌برای تشخیص آلودگی کشت‌های سلولی به ویروس pestivirus

در این مطالعه یک روش Nested-PCR ‌برای تشخیص دو ویروس BVDV ‌از سویه NADL ‌بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه ‌‌'5 ‌ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR در وکتور R/T57pTZ کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش Nested-PCR ‌انجام گردید و یک قطعه DNA ‌به طول 155 جفت باز تکث...

متن کامل

تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت سلول به روش PCR

مقدمه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی در شرایط آزمایشگاه با گونه های مایکوپلاسما می تواند به مشکلاتی در ارگانیسم های زنده منجر شود. بنابراین، تهیه یک پروتکل تشخیص روتین برای عفونت های مایکوپلاسمایی، جهت به دست‌ آوردن نتایج تحقیقاتی قابل اعتماد، ضروری و انکارناپذیر است. به دلیل محدودیت در روش های متواتر، این اواخر تکنولوژی هایی بر پایه اسید نوکلئیک خصوصا روش های بر پایه واکنش زنجیره ای پلیمراز (P...

متن کامل

راه‌اندازی روش RT-Nested PCR به منظور تشخیص ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک

  چکید ه   سابقه و هدف   ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک( HIV-1 ) عامل ایجاد کننده سندرم نقص ایمنی اکتسابی انسانی”ایدز” می‌باشد. انتقال بیماری از طریق انتقال خون در دوره پنجره، در مراکز انتقال خون یک معضل جهانی محسوب می‌شود. علاوه بر این، نیاز مبرمی برای تشخیص سریع، حساس و دقیق عفونت HIV-1 قبل از ظهور آنتی‌بادی در بدن فرد آلوده در بیمارستان‌ها و مراکز بهداشتی احساس می‌شود. تشخیص ژنوم ویروس HIV-1...

متن کامل

به کارگیری یک روش حساسrt-nested pcr برای تشخیص ویروس هپاتیت c

هدف: ویروس هپاتیت cیکی از مهمترین عوامل ایجاد کننده هپاتیت ویروسی به شمار می رود و تشخیص آن در نمونه های مشکوک از اهمیت بالایی برخوردار است. خطر انتقال عفونت ویروسی از طریق تزریق خون و فرآورده های آن ناشی از نقص روش های غربالگری سرولوژیک در تشخیص اهداکنندگان آلوده ای است که در دوره پنجره بیماری هستند. بنابراین تشخیص دقیق و به موقع عفونت hcvپیش از ظهور آنتی بادی در بدن فرد آلوده از اهمیت ویژه ای...

متن کامل

راه اندازی فن PCR برای تشخیص آلودگی به ویروس HTLV-1 در بافتهای پارافینه

Introduction: HTLV-1 , the first known human retrovirus belongs to oncovirus subfamily of retroviruses. The major characteristic of HTLV-1 is its highly restricted geographic prevalence. Northern part of Khorasan is an endemic region of HTLV-1 infection. Epidemiological studies can help in designing preventive programs for HTLV-1 infection. The aim of this study was the establishment of a PCR t...

متن کامل

شناسایی آلودگی مایکوپلاسما اوراله در کشت های سلولی با استفاده از روش pcr

زمینه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئله ای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می شود. میزان بالایی از کشت های سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت می گیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن به منظور جلوگیری از زیان های مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگان ها(microorganisms) بسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه اندازی و به کارگیری روش واکنش...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله تحقیقات دامپزشکی (journal of veterinary research)

ناشر: دانشگاه تهران

ISSN 2008-2525

دوره 63

شماره 1 2008

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023